JEG3细胞系（人绒毛膜癌细胞系）

JEG-3细胞是一种超三倍体、克隆衍生、具有上皮形态的人类细胞系，源自Erwin Turner肿瘤的Woods菌株分离出的六个克隆衍生株系之一。

JEG-3细胞的染色体特征为超三倍体，模态染色体数目为71，发生率为34%，多倍体发生率为2.6%。常见的染色体异常包括t(4;11)(p15;q13)、i(13q)、t(10p15q)、del(18)(q21)及其他标记物。同时见到在一颗N14和两颗N22中可以看到巨大的卫星。N2、N5和N9有4个副本，N7、N13、N18、N21和X有一个副本。通过Q带检查检测到单个Y染色体。

JEG3细胞系特性

JEG-3细胞能够在裸鼠身上形成恶性肿瘤，模拟绒毛膜癌的病理特征。
JEG3细胞系表达人绒毛膜促性腺激素（hCG）、胎盘催乳素（绒毛膜体乳营养素）和黄体酮。
同工酶分析显示AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、PGM1和PGM3的特定异构型。
JEG-3细胞能够将类固醇前体转化为雌酮和雌二醇。
基因表达：人绒毛膜促性腺激素；人绒毛膜体乳营养素（胎盘催乳素）；黄体酮

JEG3细胞系参数表

细胞系名称	JEG3细胞系（人绒毛膜癌细胞系）
细胞别称	Jeg-3；JEG3；Jeg3；jeg3
细胞类型	超三倍体、克隆衍生的上皮形态人类细胞系
来源	Erwin Turner肿瘤的Woods菌株中分离出的六个克隆衍生株系之一
疾病特征	绒毛膜癌
细胞形态	上皮细胞样
生长特性	贴壁生长
卫星染色体	N14和两颗N22中可见巨大的卫星
多拷贝染色体	N2、N5、N9有4个拷贝
单拷贝染色体	N7、N13、N18、N21和X为单拷贝
Y染色体	通过Q带检查可检测到单个Y染色体
基因表达	人绒毛膜促性腺激素（hCG）、人绒毛膜体乳营养素（胎盘催乳素）、黄体酮
同工酶	AK-1, 1；ES-D, 1；G6PD, B；GLO-I, 1-2；PGM1, 1；PGM3, 1-2
类固醇转化功能	能够将类固醇前体转化为雌酮和雌二醇
致瘤性	在裸鼠身上形成与绒毛膜癌一致的恶性肿瘤
倍增时间	~24-36小时
培养体系	MEM+10% FBS+1% P/S
配套培养基货号	TCH-G417
传代比例	1:2-1:4，每2-3天换液一次
传代周期	48-72小时
培养条件	气相：95%空气+5% CO2，温度：37℃
冻存条件	60%基础培养基+30% FBS+10% DMSO，液氮储存
质量检测	细菌、真菌、支原体检测均为阴性
生物安全等级	1
支原体检测	无
保藏机构	ATCC: HTB-36；BCRC: 60428；BCRJ: 0123；DSMZ: ACC-463；ECACC: 92120308

培养教程

JEG3人绒毛膜癌细胞系培养教程

细胞复苏

将含有1 mL JEG-3细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，时间控制在1-2分钟内。
解冻后迅速将JEG-3细胞悬液移入事先准备好的含有4 mL培养基的15 mL离心管中，轻轻混合均匀。
在1000 rpm条件下离心4分钟。
弃去上清液，加入1 mL培养基轻轻吹匀。
将所有JEG-3细胞悬液加入含有5 mL培养基的培养瓶中，或将JEG-3细胞悬液加入10 cm培养皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜。
第二天更换培养基并检查细胞密度。

细胞传代

当JEG-3细胞密度达到80%-90%时，弃去培养上清液。
用不含钙、镁离子的PBS润洗JEG-3细胞1-2次。
加入2 mL消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有JEG-3细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟（视细胞情况而定）。
在显微镜下观察JEG-3细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加3 mL完全培养基终止消化。
轻轻打匀后将JEG-3细胞悬液移入无菌离心管中，在1000 rpm条件下离心5分钟，弃去上清液。
加入1-2 mL培养基轻轻吹匀。
将JEG-3细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含有8 mL培养基的培养瓶或培养皿中。
放入培养箱中继续培养。

细胞冻存

当JEG-3细胞生长状态良好时，收集JEG-3细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中。
在1000 rpm条件下离心4分钟，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行JEG-3细胞计数。
根据JEG-3细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5×10^6~1×10^7 cells/mL，轻轻混匀。
每支冻存管加入1 mL JEG-3细胞悬液，做好标识。
将冻存管放入-80℃冰箱预冻24小时后，转入液氮储存。
记录冻存管位置以便下次取用。