JAR细胞系（人胎盘绒毛癌细胞）

JAR细胞是源自一名24岁女性胎盘（男性胎儿）滋养层肿瘤的细胞系。

JAR细胞是假三倍体状态，染色体数通常为68，出现在24%的细胞中；但也有色体数为69（22%）和70（18%）的细胞。其核型异常复杂，大多数细胞具有20到25条标记染色体（>染色体总含量的30%），其中许多显示复杂的结构重排。
这些标记的染色体片段的来源往往难以识别。在常见的标记物中有8p+、11p、大的中心[？t（3qter-3q12:：？-C-？：3q12-3qter）]der（？13）t（1；？13）（p13；？q14）和许多其他标记物。只有一条正常的X染色体。未发现正常N3和N13。

JAR细胞系特性

JAR 细胞生长形态为上皮细胞样，以贴壁方式生长。
JAR细胞表达雌激素、孕激素、人绒毛膜促性腺激素和人绒毛膜体乳营养素（胎盘催乳素）。
JAR细胞经重新培养后，hCG 平均产量为22.5 ng/mL。
同工酶:AK-1，1；ES-D，2；G6PD，B；GLO-I，1；PGM1, 1-2；PGM3，1-2。

JAR细胞系参数表

细胞名称	JAR细胞系（人胎盘绒毛癌细胞）
细胞别称	Jar; JAr; JaR; 人胎盘绒毛癌细胞
种属来源	人
年龄性别	男；胎儿（细胞系由 R.A. Pattillo 从一名24岁女性的胎盘滋养层肿瘤建立，但细胞系来自男性胎儿）
组织来源	胎盘；绒毛绒膜癌;JAR 细胞源自胎盘滋养层肿瘤
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
细胞代数	10代以内
支原体检测	无
推荐换液	2~3次/周
传代比例	1:3-1:4
培养基	90% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% PS
培养条件	气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	基础培养基 + 5% DMSO + 40% FBS，液氮保存
重要提醒	JAR 细胞贴壁不牢，加入 PBS 或胰酶时，应小心沿壁加入，如细胞飘起，应收集到离心管中，避免细胞大量损失
生物安全等级	1
倍增时间	~20-30 小时
基因表达	雌激素；孕酮；人绒毛膜促性腺激素（hCG）；人绒毛膜体乳营养素（胎盘催乳素）；再培养后的 hCG 产量平均为 22.5 ng/mL
同工酶	AK-1，1；ES-D，2；G6PD，B；GLO-I，1；PGM1, 1-2；PGM3，1-2
保藏机构	ATCC；HTB-144；BCRC；60491；DSMZ；ACC-462

培养教程

JAR人胎盘绒毛癌细胞系培养教程

细胞复苏

将含有1 mL JAR细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻。
将解冻后的JAR细胞悬液移入事先准备好的含有4 mL培养基的15 mL离心管中混合均匀。
以1000 rpm条件离心4分钟，弃去上清液。
加入1 mL培养基吹匀，然后将所有JAR细胞悬液移入含有5 mL培养基的培养瓶中培养过夜。
第二天换液并检查JAR细胞密度。

细胞传代

当JAR细胞密度达80%-90%时，即可进行传代培养。
吸走培养基，加入3-5 mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗JAR细胞。
吸干PBS后加入1 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA，轻轻摇晃培养瓶使胰酶覆盖JAR细胞表面，将培养瓶放入37℃培养箱中消化。
当JAR细胞间隙变大但未脱落，可轻轻吹下时即刻终止消化，避免JAR细胞完全脱落。
加入6-8 mL完全培养基终止消化，轻轻吹下JAR细胞并混匀。
以1000 rpm条件离心3分钟，弃去上清，再用新鲜培养基重悬JAR细胞。
将JAR细胞悬液按1:3至1:4的比例分到新的培养瓶中继续培养。

细胞冻存

待JAR细胞生长状态良好时进行细胞冻存。
吸走培养基，加入PBS润洗JAR细胞。
加入0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化JAR细胞并收集到离心管中。
以1000 rpm条件离心4分钟，弃去上清，用培养基重悬JAR细胞并计数。
根据JAR细胞数量加入适量的血清和DMSO（终浓度为10%），轻轻混匀。
每支冻存管冻存1 mL JAR细胞悬液（密度为1-2 x 10^6 cells/mL），做好标识。
将冻存管置于程序降温盒中，放入-80℃冰箱，至少2小时后转移到液氮中保存。

注意事项

JAR细胞对消化较为敏感，消化过度会严重影响JAR细胞状态，可能导致传代后JAR细胞死亡或不生长。
JAR细胞消化到细胞间隙变大但未完全脱落时，即可轻轻吹打细胞终止消化。
混匀JAR细胞时应尽量轻柔，避免产生大量气泡。
培养过程中应定期检查JAR细胞状态和密度，及时进行传代和换液。