HUVEC是经SV40转化的永生化细胞，源自人脐带静脉，可稳定传代20代以上。在血管生成、炎症和氧化应激等方面，HUVEC细胞有着典型的应用价值。

在培养过程中，HUVEC呈现出鹅卵石状外观，核较大而暗，细胞大小均匀，有高的有丝分裂指数，且无平滑肌细胞的存在。为了有效培养HUVEC，可在低血清条件下使用含有人重组VEGF的血管细胞基础培养基，也可选择含有牛脑提取物的培养基获得更“真实”、不那么明确定义的培养环境。

HUVEC细胞适用于研究低氧、炎症、氧化应激、感染反应以及正常和肿瘤相关的血管生成等应用。

HUVEC细胞特性

• 特性：HUVEC永生化是源自人脐带静脉的内皮细胞，通过SV40转化而获得的永生化细胞，具有典型的血管内皮细胞形态，表达多种特异性标记物如CD31、vWF，同时代谢活性高。

• HUVEC细胞主要应用在血管研究中，可研究动脉粥样硬化、炎症、氧化应激等对内皮细胞的影响，以及药物对血管生成、炎症和氧化应激等方面。

• 形态特征：HUVEC永生化在培养过程中呈现出鹅卵石状外观，核较大而暗，细胞大小均匀，有高的有丝分裂指数，且无平滑肌细胞的存在，与思泰默原代HUVEC细胞相比，HUVEC永生化培养中有见漂浮颗粒物、漂浮细胞和部分形变细胞，来源于SV40转化和筛选过程，为正常现象，多见于永生化细胞。

HUVEC细胞参数表

细胞名称	HUVEC细胞（SV40永生化细胞，人脐静脉血管内皮细胞）
细胞来源	人脐静脉血管内皮细胞
细胞别称	HUVEC+SV40; HUVEC（SV40）
细胞形态	内皮细胞样
细胞类型	转化细胞系
生长特性	贴壁细胞
安全等级	2
培养条件	气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 冻存条件：冻存液：40%FBS，DMSO 5%。
活性	96％以上细胞有DiI-Ac-LDL摄取的特性； 细胞经 vWF，CD31因子特异性免疫反应检测。
病毒检测	HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌均为阴性。
培养基	内皮细胞专用培养基
存活率	≥ 90%
细胞特性	经SV40转化的永生化细胞 稳定传代20-40代
形态特征	典型的血管内皮细胞形态 鹅卵石状外观  核较大而暗 无平滑肌细胞的存在 与思泰默原代HUVEC细胞相比培养中有见漂浮颗粒物、漂浮细胞和部分形变细胞， 来源于SV40转化和筛选过程，为正常现象，多见于永生化细胞。
特异性标记物	CD31、vWF 等
培养条件	低血清条件下使用含有人重组VEGF的血管细胞基础培养基 可选择含有牛脑提取物的培养基 内皮细胞专用培养基
增殖特性	在低血清条件下培养 使用人重组VEGF的血管细胞基础培养基可促进增殖
研究应用	用于研究低氧、炎症、氧化应激、感染反应等对内皮细胞的影响 用于研究血管生成和药物筛选

HUVEC细胞培养指南

培养前准备：

• 检查培养瓶：收到培养瓶后，用倒置显微镜检查是否有污染或细菌，注意观察是否有细胞脱落。

• 培养基准备：使用内皮细胞基础培养基，添加血清和生长因子，确保提供足够的营养物质。

培养操作步骤：

• 贴壁培养

• 多余培养基吸取至无菌管，保留5-8mL左右。

• 将培养瓶置于含有5% CO₂的37℃恒温培养箱中培养。

冻存操作步骤：

    解冻：

• 将冻存管置于37℃水浴中快速解冻，避免污染。

• 用70%酒精喷拭冻存管表面，操作需在生物安全柜中进行。

    转移细胞：

• 将细胞转移到含有完全培养基的离心管中，离心去除上清。

    悬浮细胞并传代：

• 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。

• 置于37℃预热后的培养箱中培养。

培养注意事项：

• 培养基选择：使用内皮专用培养基，确保提供细胞所需的适当营养物质。

• 细胞密度控制：注意接种细胞时的密度，过多或过少的细胞都会影响细胞生长和传代效果。

细胞鉴定及注意事项：

• 细胞纯度鉴定：可通过检测HUVEC细胞的特定蛋白表达等方式进行鉴定。

• 培养要点：HUVEC细胞对培养条件要求较高，使用专用培养基和高品质胎牛血清进行培养。