HTR8-SVneo是一种人绒毛膜外滋养层细胞系，于1992年从6至12周孕龄的胎盘组织中分离，并通过转染表达猿猴病毒40（SV40）大T抗原的基因获得了永生化特性。HTR8-SVneo细胞系在研究胎盘生物学和滋养层功能方面具有重要的应用价值，被广泛用于妊娠相关疾病及其机制的研究。HTR8-SVneo细胞系由ATCC等权威机构提供，确保了其身份的准确性和活性，是研究滋养层生物学的理想模型。

HTR8-SVneo细胞特性特征

• HTR8-SVneo细胞表达多种特定标志物：胰岛素样生长因子（IGF）-II、NDOG-5（胎盘碱性磷酸酶抗体）、增殖细胞核抗原（PCNA）、人白细胞抗原框架抗原（W6/32）、整合素亚基α1、α3、α5、αv和β1，以及αvβ3/β5玻连蛋白受体

• 阴性标记：HTR8-SVneo细胞角蛋白-7、PLAP抗体（NDOG-5）、PCNA、W6/32等抗原表达上呈阳性；对于噬菌体标记63/D3、内皮细胞标记因子VIII、α6和β4整合素亚基标记呈阴性。

• 基因特征：HTR-8/SVneo细胞系的基因组中包含与滋养层细胞功能相关的基因，能够在体外模拟胎盘滋养层细胞的生物学特性。这些基因的表达使得细胞在侵袭和迁移方面表现出与体内滋养细胞相似的行为。

• HTR8-SVneo细胞具有致瘤性，但在软琼脂中的致瘤性测试结果表明，该细胞系不表现出显著的致瘤性

• 注意：HTR8-SVneo细胞系已被证明含有上皮和间质样细胞群。

HTR8-SVneo细胞参数表

HTR8-SVneo人绒毛膜滋养层细胞培养教程

传代方法

• 当HTR8-SVneo细胞的融合度达到70%-80%时，应进行传代，以防止细胞过度融合。传代步骤如下：

• 弃去培养HTR8-SVneo细胞的旧培养基，使用PBS缓冲液洗涤两次。

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液消化HTR8-SVneo细胞，37℃孵育2-3分钟。

• 当HTR8-SVneo细胞开始脱落时，加入含有血清的培养基终止消化，并轻柔吹打形成单细胞悬液。

• 将HTR8-SVneo细胞按1:2至1:4的比例接种到新的培养瓶中继续培养。

冻存方法

• 为了长期保存HTR8-SVneo细胞，建议按照以下步骤进行冻存：

• 在HTR8-SVneo细胞处于对数生长期时，收集细胞并用PBS洗涤两次。

• 将HTR8-SVneo细胞重悬于含90% FBS和10% DMSO的冻存液中，细胞密度调整为1×10^6至1×10^7 cells/mL。

• 将HTR8-SVneo细胞悬液分装到冻存管中，并放置于-80℃冰箱中过夜。

• 次日将HTR8-SVneo细胞冻存管转移至液氮罐中长期保存。

复苏方法

• HTR8-SVneo细胞复苏时需要快速且谨慎，以减少细胞损伤：

• 从液氮中取出HTR8-SVneo细胞冻存管，立即在37℃水浴中快速复苏。

• 将HTR8-SVneo细胞悬液转移至含培养基的离心管中，缓慢加入培养基以稀释DMSO。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清后，加入预温的完全培养基重悬HTR8-SVneo细胞。

• 将复苏后的HTR8-SVneo细胞接种到培养瓶中，置于37℃的培养箱中培养。

注意事项

• 在HTR8-SVneo细胞的培养过程中，应注意以下事项：

• 定期检查HTR8-SVneo细胞是否存在细菌、酵母或支原体的污染。

• 在消化和传代HTR8-SVneo细胞时，应避免过度消化和机械损伤，以防止细胞受损。

• 冻存前确保HTR8-SVneo细胞处于对数生长期，且细胞密度适中，以保证复苏后HTR8-SVneo细胞的活性。