293E细胞【人胚肾细胞(EBNA1基因修饰)】

293E人胚肾细胞（EBNA1基因修饰）是从HEK293细胞系衍生而来的。HEK293细胞系最初由Alex van der Eb在1973年通过将人胚胎肾细胞转染腺病毒5型DNA片段建立，具体实验由Frank Graham实施。293E细胞在此基础上引入了EBNA1基因修饰，EBNA1即Epstein-Barr病毒核抗原1，这种修饰增强了细胞的基因表达能力，使293E细胞在稳定表达EBNA1方面具有显著优势。

293E细胞特性特征

293E细胞在19号染色体上整合了约4.5 kb的腺病毒DNA片段。

293E细胞通过引入EBNA1（Epstein-Barr病毒核抗原1）基因进行修饰。

293E细胞参数表

细胞名称	293E细胞【人胚肾细胞(EBNA1基因修饰)】
细胞别称	293 c18; 293c18; HEK 293 c18; HEK-293 c18; HEK293-EBNA1; HEK-293-EBNA; HEK 293-EBNA;HEK 293 EBNA; HEK293EBNA; 293 EBNA;
细胞来源	人；胚胎肾脏
细胞类型	转化细胞系
形态	上皮细胞样；多角形
基因修饰	EBNA1基因；可稳定表达EBNA1
来源细胞系	293 [HEK-293]细胞
培养方式	贴壁生长
培养基	IMDM + 10% FBS + 1% P/S
细胞密度	1×10^6cells/T25培养瓶
培养环境	37°C；5% CO2
生物安全等级	BSL-2
应用限制	仅用于科研或工业，不可用于临床诊断或治疗
基因表达	可稳定表达EBNA1

培养教程

293E人胚肾细胞(EBNA1基因修饰)培养教程

细胞复苏

从液氮中取出冻存的293E细胞，迅速置于37°C水浴中解冻。
将解冻的293E细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。
离心洗涤293E细胞，去除冻存保护剂。
将293E细胞重悬于新鲜培养基中，并转移到培养瓶中。

常规培养

使用T25培养瓶，初始接种密度为1×10^6 293E细胞/瓶。
每2-3天更换新鲜培养基。
观察293E细胞的生长状态，保持细胞密度在70-80%左右。

传代

当293E细胞密度达到80-90%时进行传代。
用PBS轻轻洗涤293E细胞层。
加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-3分钟。
轻轻拍打培养瓶，使293E细胞脱落。
加入含血清的培养基终止消化。
按照1:3 - 1:6的比例进行传代，根据293E细胞的生长状态调整具体比例。

细胞冻存

收集对数生长期的293E细胞。
制备冻存液（90% FBS + 10% DMSO）。
调整293E细胞浓度至1-2×10^6 cells/mL。
将293E细胞悬液分装到冻存管中。
使用程序降温盒缓慢降温，最终转移到液氮中长期保存。

注意事项

定期检查293E细胞形态和生长状态。
保持无菌操作，防止污染。
避免293E细胞过度生长或密度过低。
定期进行支原体检测。

质量控制

定期进行293E细胞活性检测。
进行细菌、真菌、霉菌污染物镜检。
进行衣原体、支原体检测。
必要时进行STR鉴定，确保293E细胞系纯度。