NCCIT人畸胎癌细胞系于1985年从一名患有多能性胚胎癌的亚洲成年男性患者的纵隔中分离出来，具有上皮形态。

NCCIT细胞系曾受到支原体污染，但在提交到ATCC细胞库前已进行了清除。NCCIT细胞主要以贴壁方式生长，而非悬浮或半贴壁。它们表现出上皮细胞样的形态。

nccit细胞特性、分子特性、基因特性等

• nccit细胞是一种多能性干细胞，具有分化成多种细胞类型的能力。

• nccit细胞细胞可以分化成体细胞和胚外组织，显示出广泛的分化潜力。

• 表达特征:蛋白表达：角蛋白（Keratin）阴性、波形蛋白（Vimentin）阳性、胎盘碱性磷酸酶（Placental alkaline phosphatase）阳性。

• 未分化的NCCIT细胞在特征上介于精原细胞癌和胚胎癌之间。

• 在维甲酸（视黄酸）作用下，NCCIT细胞表现出明显的分化反应。

• 由于源自畸胎癌，nccit细胞可能表达某些与肿瘤发生和进展相关的基因。

• nccit细胞是致瘤的，在皮下接种107个细胞的裸鼠中，肿瘤在21天内以100%的频率（5/5）发展。

nccit细胞参数表

细胞名称	nccit细胞（人畸胎癌细胞）
细胞 别称	NCCIT / NCC-IT
组织来源	人 (Homo sapiens) 畸胎癌细胞；纵隔混合型生殖细胞肿瘤
细胞类型	多能性胚胎癌细胞
建立背景	1985年 / Shinichi Teshima / 日本东京国立癌症研究所
原始患者信息	亚洲成年男性
形态学特征	上皮细胞样 / 贴壁生长
培养基	RPMI-1640 / 10% 胎牛血清 / 1% （如庆大霉素-两性霉素B混合溶液）
培养环境	培养温度37℃ / CO₂ 5% / 空气 95%
分子标记	角蛋白：阴性 / 波形蛋白：阳性 / 胎盘碱性磷酸酶：阳性
分化潜能	可分化为体细胞和胚外组织
维甲酸反应	表现出分化
致瘤性	具有
主要用途	癌症研究、干细胞研究、药物筛选
安全等级	BSL1（生物安全一级）
潜在危害	低风险，遵循标准预防措施
支原体检测	阴性（曾受污染，已净化）
细胞库来源 / 提供规格	ATCC（推测）/ 1×10⁶cells/T25培养瓶 或 5×10⁵cells/冻存管
特殊处理要求	仅限科研用途，不得用于其他目的

nccit人畸胎癌细胞培养教程

NCCIT细胞复苏步骤

• 将冻存的NCCIT细胞从液氮中取出，迅速置于37℃水浴中融化。

• 融化后，将NCCIT细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。

• 低速离心（约1000rpm）5分钟，弃去上清。

• 用预热的完全培养基重悬NCCIT细胞，转移到培养瓶中。

NCCIT细胞常规培养

• NCCIT细胞以贴壁方式生长，呈上皮细胞样形态。

• 每2-3天更换一次培养基，或当培养基颜色变黄时更换。

• 保持NCCIT细胞在对数生长期，避免过度生长。

NCCIT细胞传代步骤

• 当NCCIT细胞融合度达到80%左右时进行传代。

• 用PBS轻轻洗涤NCCIT细胞层1-2次。

• 加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育2-3分钟。

• 轻轻拍打培养瓶，使NCCIT细胞脱落。

• 加入含血清的完全培养基终止消化。

• 离心收集NCCIT细胞，按1:3或1:4的比例接种到新的培养瓶中。

NCCIT细胞冻存步骤

• 收集对数生长期的NCCIT细胞。

• 制备冻存液（90%培养基 + 10% DMSO）。

• 调整NCCIT细胞浓度至1-5×10^6 cells/ml。

• 将NCCIT细胞悬液分装到冻存管中。

• 使用程序降温仪或梯度降温盒逐步降温。

• 最终将NCCIT细胞转移到液氮中长期保存。

NCCIT细胞培养注意事项

• 操作前，培养基和PBS应在37℃预热1-2小时。

• 严格无菌操作，定期检查是否有污染。

• 避免NCCIT细胞过度生长或密度过低。

• 定期进行NCCIT细胞特性鉴定，如STR分析，以确保细胞系的真实性。

• NCCIT细胞仅限于科研用途，不得用于其他目的。

NCCIT细胞培养基更换周期

• 通常每2-3天更换一次培养基。

• 如果NCCIT细胞生长较快，可能需要更频繁地更换培养基。

NCCIT细胞观察要点

• 定期使用显微镜观察NCCIT细胞形态和生长状态。

• 关注NCCIT细胞贴壁情况、生长密度和培养基颜色变化。

NCCIT细胞在不同培养条件下的表现

• 标准条件：在37℃、5% CO₂和95%空气浓度下，NCCIT细胞表现出良好的生长状态，贴壁生长，呈上皮细胞样形态。

• 低血清条件：在低血清条件下，NCCIT细胞可能生长缓慢，分化状态可能发生变化。

• 高密度条件：在高密度条件下，NCCIT细胞可能出现过度融合，影响细胞的正常生长和功能。

• 不同pH值：pH值的变化可能影响NCCIT细胞的代谢和生长状态，建议保持在7.2-7.4之间。

NCCIT细胞培养时间

• 传代周期：通常每2-3天更换一次培养基，或当培养基颜色变黄时更换。当NCCIT细胞融合度达到80%左右时进行传代。

• 实验周期：根据具体实验需求，培养时间可能从几天到几周不等。例如，药物筛选实验可能需要几天，而分化实验可能需要更长时间。