HMC3细胞是一种通过SV40永生化人胎儿大脑原代小胶质细胞培养物建立的人脑小胶质细胞系。HMC3细胞系保留了原代小胶质细胞的特性，可以无限期生长的同质细胞群。

HMC3细胞对小胶质细胞/巨噬细胞标记物IBA1呈强阳性，对内毒素受体CD14呈阳性，但对星形胶质细胞标记物GFAP呈阴性。

HMC3细胞系特性

• 通过SV40永生化的HMC3细胞保留了原代小胶质细胞的特性。

• HMC3细胞可以无限期生长，适合用于小胶质细胞功能生化分析。

• HMC3细胞支持转染，可用于研究各种基因的表达调控。

• 静息状态下，HMC3细胞对小胶质细胞/巨噬细胞标记物IBA1和内毒素受体CD14呈阳性，但对星形胶质细胞标志物GFAP呈阴性。

• 活化状态下，HMC3细胞的MHCII、CD68和CD11b在静息状态下为阴性，但在被IFN-γ（10ng/ml，24小时）激活后上调。

HMC3细胞系参数表

HMC3人脑小胶质细胞系培养教程

HMC3细胞的复苏

• 将含有1mL HMC3细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。

• 加入解冻的HMC3细胞悬液到含8-10mL完全培养基的离心管中，混合均匀。

• 在1000RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液，重悬HMC3细胞。

• 将HMC3细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中，在37℃培养过夜。第二天使用显微镜观察HMC3细胞生长情况和密度。

HMC3细胞的传代

• 当HMC3细胞密度达到80%-90%时，进行传代培养。

• 使用不含钙、镁离子的PBS润洗HMC3细胞，加入0.25%（w/v）胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中消化1-2分钟。

• 消化后观察HMC3细胞状态，绝大多数细胞变圆并脱落时，加入含10% FBS的培养基终止消化。

• 离心并去除上清液，重悬HMC3细胞并按1:3的比例分到新培养瓶中，根据需要调整培养基。

HMC3细胞的冻存

• 在HMC3细胞培养前3代时，冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

• 制备冻存液（推荐配比：55%（基础培养基DM/F12）+ 40%（血清）+ 5%（DMSO））。

• 将HMC3细胞悬液加入冻存液后，分装到冻存管中，放入-80℃冰箱过夜，随后转移到液氮长期保存。