HEK-293FT细胞（人胚胎肾细胞）

HEK-293FT细胞系衍生自293F细胞系。

HEK-293FT细胞系是一种源自于SV40大T抗原转化的人胚胎肾细胞的衍生物，具有快速生长、高效转染和高病毒滴度的特点。
293FT人胚肾细胞系是使用ViraPower™慢病毒表达系统产生高滴度慢病毒的理想细胞系。当将ViraPower™表达载体和ViraPower慢病毒包装混合物共转染到HEK-293FT细胞中时，会产生高水平的病毒RNA以及包装所需的gag ⁄ pol和rev蛋白。
HEK-293FT细胞是非常适合生产慢病毒的宿主。并稳定表达来自pCMVSPORT6TAg.neo质粒的SV40大T抗原。SV40大T抗原的表达由人巨细胞病毒（CMV）启动子控制，并且是高水平和组成型的。

HEK-293FT细胞特性

HEK-293FT细胞系是通过SV40大T抗原转化的人胚胎肾细胞衍生物，具有快速生长、高效转染能力和高病毒滴度。
HEK293f细胞是慢病毒表达系统中的理想宿主，非常适合生产慢病毒。
HEK293f细胞来源于SV40大T抗原转化的人胚胎肾细胞，具有高度可转染性。
使用ViraPower™慢病毒表达系统时，293FT细胞可产生高水平的病毒RNA和所需的包装蛋白。
HEK293ft细胞系具有高水平和组成型的SV40大T抗原表达。
HEK293ft细胞系生长快速，易于转染。

HEK-293FT细胞参数表

细胞名称	HEK-293FT细胞（人胚肾细胞）
别称	HEK-293FT, HEK 293FT, HEK-293-FT, HEK293FT, 293-FT, 293FT, FT-293
种属来源	人
组织来源	胚胎肾
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
细胞纯度	93%
细胞活力	87%（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）
污染检测	不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
冻存条件	55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO，液氮储存
运输条件	干冰运输（1Vial）或活细胞运输（T-25flasks）
细胞培养基	DMEM-H10%FBS1%NEAA / RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗+800ng/ml Taxol
培养温度	37.0°C
CO2浓度	空气 95%，CO2 5%
传代比例	1:3-1:5
换液频率	2-3次/周
重要特性	- 来源于SV40大T抗原转化的人胚肾细胞，具有高度可转染性。
	- 高水平和组成型的SV40大T抗原表达。
	- 适用于ViraPower™慢病毒表达系统，产生高水平的病毒RNA和包装蛋白。
使用建议	如果要使用ViraPower™慢病毒表达系统产生高滴度的慢病毒，293FT细胞系是理想的选择。
使用建议	293FT细胞系是生长快速，非常易于转染的克隆分离物。
用途	仅限科研使用，不可用于临床诊断和治疗
保藏机构	ATCC; PTA-5077

培养教程

HEK-293FT细胞(人胚肾细胞)培养说明

解冻步骤

从液氮中取出细胞冻存管，快速在 37°C 水浴中解冻。
使用 70% 酒精对冻存管外壁消毒，将细胞转移到含 PBS 的 15 mL 无菌试管中，离心并重悬于不含 Geneticin 的 2 mL 完全培养基中。
将细胞转移至含 10 mL 完全培养基的 T-75 cm² 培养瓶中。
在 37°C 下过夜孵育，直至细胞贴附到瓶底。
第二天吸走培养基，替换为含有 500 μg/mL Geneticin 的新鲜完全培养基。

传代培养细胞

吸走培养瓶中的全部培养基，用 10 mL PBS 洗涤细胞，去除多余的培养基和血清。
加入 2 mL 胰蛋白酶/EDTA 溶液，室温下孵育至细胞脱壁，确认大多数细胞已脱壁。
加入 8 mL 含有 Geneticin 的完全培养基，将细胞悬液转移至 15 mL 无菌锥形管中。
测定细胞活力和总细胞数。
使用推荐密度接种细胞至新的培养瓶。

冷冻细胞

将HEK-293FT细胞培养至 70-90% 汇合度。
将细胞悬液离心，去除培养基，转移至预冷的冷冻培养基中。
分装细胞悬液至冻存管，控制冷冻速率并存储于液氮中。

转染细胞

细胞保持在健康状态并达到适当的汇合度。
对细胞进行铺板，使之在转染时达到 90-95% 的汇合度。
将质粒构建体转染至HEK-293FT细胞中。
转染完成后，加入含有 500 μg/mL Geneticin 的新鲜培养基，恢复细胞 24-48 小时后进行实验。