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.jpg) |
| 产品名称:sk-mel-2细胞(人皮肤黑色素瘤细胞) |
| 产品详细说明 |
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来源:皮肤;大腿部位的转移病灶
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细胞特征:贴壁细胞 , 多边形
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培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
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其他:抗原表达:A型血、Rh阳性
SK-MEL-2细胞系是一种源自60岁白人男性的多边形形态细胞系。sk-mel-2细胞最初是从患者恶性黑色素瘤的皮肤转移组织中分离,尤其是大腿部位的转移病灶。
SK-MEL-2细胞系从亚二倍体到超四倍体不等,并具有一些遗传异常,例如双着丝粒、次生缩窄和显著的端粒标记。
sk-mel-2细胞相关特性特征
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细胞遗传不稳定性:文献报道sk-mel-2细胞存在一定程度的不稳定性
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致瘤性:sk-mel-2细胞在裸小鼠中可形成恶性黑色素瘤
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转移性:源自皮肤转移灶,具有转移潜能
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抗原表达:A型血、Rh阳性
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同工酶表达:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;PGM1,1;PGM3,1
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基因突变:可能携带黑色素瘤相关的基因突变(如BRAF、NRAS等)
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基因表达:可能表达黑色素瘤相关基因(如MITF、TYR等)
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特殊变种:SK-MEL-2+luc:通过慢病毒转染方式获得,携带荧光素酶(Luc)基因
sk-mel-2人皮肤黑色素瘤细胞参数表
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细胞名称
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sk-mel-2细胞(人皮肤黑色素瘤细胞)
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细胞别称
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SK-Mel-2; SK-Mel 2; SK-mel-2; SK-MEL2; SK.MEL.2; SKMEL-2; SKMEL2; SKmel2; SK-ML2; SKml2
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种属
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人
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来源患者
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60岁白人男性
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组织来源
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皮肤(大腿皮肤转移部位)
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形态
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多边形,上皮细胞样
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生长特性
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贴壁生长
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细胞代数
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10代以内
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细胞规格
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1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管
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培养基
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MEM+10%FBS+P/S(MEM含EBSS,NEAA)
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培养条件
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95%空气+5%二氧化碳,37℃
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传代密度
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细胞密度达80%-90%
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传代比例
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首次传代1:2
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冻存条件
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无血清冻存液,液氮储存
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遗传不稳定性
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存在一定程度的不稳定性
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致瘤性
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在裸小鼠中可形成恶性黑色素瘤
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转移性
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源自皮肤转移灶,具有转移潜能
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抗原表达
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A型血;Rh+
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同工酶
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AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 2; PGM1, 1; PGM3, 1
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支原体检测
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阴性
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细菌/真菌
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阴性
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病毒检测
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HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均阴性
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生物安全
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二级(BSL-2)
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特殊变种
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SK-MEL-2+luc(携带荧光素酶基因)
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供应限制
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仅限科学研究,不可用于临床治疗
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保存方法
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液氮储存
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培养教程
sk-mel-2人皮肤黑色素瘤细胞培养教程
SK-MEL-2细胞复苏
SK-MEL-2细胞传代
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当SK-MEL-2细胞密度达到80%-90%时进行传代。
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用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
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加入1mL 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液,确保覆盖SK-MEL-2细胞。
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在37℃下消化1-3分钟,直至大部分SK-MEL-2细胞变圆并脱落。
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加入2-3mL完全培养基终止消化,轻轻混匀后转入无菌离心管中。
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以1000rpm离心5分钟,弃去上清。
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用1-2mL新鲜培养基重悬SK-MEL-2细胞,确保细胞均匀分布。
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按1:2或1:3的比例将SK-MEL-2细胞悬液分到新的培养瓶或培养皿中。
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加入适量培养基,继续在培养箱中培养。
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第三天换液并检查SK-MEL-2细胞密度。
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定期拍照记录SK-MEL-2细胞生长状态,确保细胞健康。
SK-MEL-2细胞冻存
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使用无血清冻存液。
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将SK-MEL-2细胞悬液分装到冻存管中。
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置于液氮中长期保存。
注意事项
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无菌操作:所有步骤需在无菌条件下进行。
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传代比例:首次传代建议1:2的比例,后续根据实验需求调整。
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细胞观察:定期观察SK-MEL-2细胞状态,确保无支原体、细菌、真菌等污染。
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培养条件控制:严格控制SK-MEL-2细胞培养条件,包括温度、CO2浓度和培养基pH值。
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显微镜观察:建议使用低倍镜(4X或5X物镜)观察传代密度,使用10X和20X物镜观察SK-MEL-2细胞形态。
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运输细胞:收到SK-MEL-2细胞后需立即转入液氮冻存或直接复苏。若因运输振动导致SK-MEL-2细胞脱落,需要离心回收。
STR鉴定及相关
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Amelogenin
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X,Y
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CSF1PO
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10,12
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D2S1338
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21,24
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D3S1358
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14,16
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|
D5S818
|
11,12,13 (ATCC=HTB-68)
|
|
12,13 (Cosmic-CLP=905955; PubMed=19372543; PubMed=25877200)
|
|
D7S820
|
11,12
|
|
D8S1179
|
11,12,13 (ATCC=HTB-68)
|
|
12,13 (PubMed=19372543)
|
|
D13S317
|
11
|
|
D16S539
|
8,9
|
|
D18S51
|
15,16
|
|
D19S433
|
12,13,15 (ATCC=HTB-68)
|
|
12,15 (PubMed=19372543)
|
|
D21S11
|
29,30
|
|
FGA
|
19,25
|
|
Penta D
|
10,15
|
|
Penta E
|
7,16
|
|
TH01
|
9
|
|
TPOX
|
8,9
|
|
vWA
|
16,17 (ATCC=HTB-68)
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|
17 (Cosmic-CLP=905955; PubMed=19372543; PubMed=25877200)
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