MET-5A细胞系源自正常成人胸膜液中的间皮细胞，转染过程中使用了含有SV40病毒早期区基因和RSV长末端重复序列（LTR）的pRSV-T质粒，采用DNA锶磷酸盐共沉淀法。转染后的细胞进行了连续传代，并每周更换培养基，经过28天后，对转化的克隆进行了独立培养。
pRSV-T质粒的关键作用是通过SV40大T抗原抑制细胞周期调控蛋白，如p53和pRb，使MET-5A细胞能够逃过正常的细胞周期检查点，保持持续的增殖能力，从而实现了细胞的永生化。
MET-5A细胞表现出间皮细胞的特征，包括对波形蛋白（vimentin）、细胞角蛋白（cytokeratin）和SV40T抗原的阳性染色表达。这些细胞同时表达间皮细胞和上皮细胞的某些标记物，反映了它们的间皮细胞起源和上皮样形态。
MET5A细胞特性
-
特殊性质：经过SV40转化的永生化细胞系，但在免疫抑制小鼠中未显示致瘤性
-
体外特性：能在半固体培养条件下形成集落
-
MeT-5A细胞对波形蛋白、角蛋白和SV40T抗原呈阳性染色。
-
转染MET-5A细胞使用了pRSV-T质粒，含有SV40病毒的早期区基因和RSV长末端重复序列（LTR）。
-
转染方法采用了DNA锶磷酸盐共沉淀法。
MET5A细胞参数表
|
细胞名称
|
MET5A细胞（人间皮细胞）
|
|
细胞别称
|
MeT5A; MeT5A; Met5A; MET5A; MesothelialcellstransfectedwithpRSV-T5A)
|
|
物种来源
|
人源(Homo sapiens); 非癌个体胸膜液
|
|
细胞信息
|
间皮来源上皮样细胞系; 上皮细胞样，贴壁生长; 约1990年
|
|
转染载体/基因/启动子
|
pRSV-T质粒; SV40早期区基因; RSV长末端重复序列(LTR)
|
|
转染方法/染色体
|
DNA锶磷酸盐共沉淀法; 可能为非整倍体（需验证）
|
|
基础培养基
|
M199基础培养基(86%); 特级胎牛血清(10%); 青霉素-链霉素(1%)
|
|
添加剂
|
ITS(1%); HEPES(2%); NaHCO3(1.5g/L)
|
|
生长因子
|
氢化可的松(400 nM); 重组人EGF(3.3 nM)
|
|
培养环境
|
37℃; 5% CO2; 70-80%湿度; pH 7.2-7.4（需验证）
|
|
生长特性
|
强贴壁性; 首次传代1:2; 70-80%汇合度时传代
|
|
倍增时间
|
约24-48小时（需验证）
|
|
冻存液/温度/复苏率
|
90%血清+10%DMSO; -80℃短期/液氮长期; >80%存活（需验证）
|
|
STR鉴定/细胞标记物
|
已通过; 波形蛋白(+), 细胞角蛋白(+), SV40 T抗原(+)
|
|
其他可能标记物
|
钙网蛋白(+), 中间丝蛋白(+)（需验证）
|
|
主要用途
|
间皮细胞生物学研究; 化学和生物制剂筛选; 毒理学研究; 间皮瘤研究（对照）
|
|
体外特性/转染效率
|
半固体培养可形成集落; 转染效率中等（需验证）
|
|
细胞因子/酶/粘附分子
|
IL-6, IL-8; MMP-2, MMP-9; ICAM-1, VCAM-1（均需验证）
|
|
生物安全等级/致瘤性/病毒检测
|
BSL-1; 免疫抑制小鼠中无致瘤性; 已进行病毒检测（结果需验证）
|
|
细胞数量/规格
|
>1x10^6个细胞/包装; T25瓶或1mL冻存管
|
|
永生化状态/细胞周期
|
SV40转化永生化; 持续增殖，绕过正常细胞周期检查点
|
|
细胞寿命/药物敏感性
|
理论上无限传代; 对特定化疗药物的敏感性（需验证）
|
|
应激反应/基因表达
|
氧化应激反应可能异于原代细胞; 基因表达谱可能有差异（需验证）
|
|
主要用途
|
前列腺癌研究，药物筛选，雄激素信号通路研究，EMT研究
|
|
细胞库编号
|
ATCC: CRL-1740; ECACC: 89110211; BCRJ: 0149; BCRC: 60088
|
您的当前位置：