hsf细胞（人皮肤成纤维细胞）SV40永生化

HSF人皮肤成纤维细胞系源自一名男性的皮肤组织，于2009年由中科院昆明细胞库建立。
hsf细胞通过慢病毒转染SV40基因，使其成为永生化细胞系，具备稳定的连续增殖能力。

hsf细胞系用于构建3D皮肤模型，研究皮肤老化、伤口愈合、基因传递及硬皮病等。其特别强大的胶原蛋白和弹力蛋白合成能力，不仅有助于修复受损皮肤组织、促进伤口愈合，还能保持皮肤的弹性和紧致度。同时，hsf细胞通过增殖和免疫调节功能，释放生物活性物质如细胞因子和生长因子，调节免疫反应并促进组织修复，对皮肤组织的抗炎、抗感染等方面具有重要意义。

hsf细胞特性

hsf细胞通过慢病毒转染SV40基因建系，实现永生化，比原代细胞具有稳定的连续增殖能力。
hsf细胞可用于构建3D皮肤模型，适合体外测试皮肤功能和安全性，应用于皮肤老化、伤口愈合、基因传递、硬皮病等研究。
hsf细胞具有强大的胶原蛋白和弹力蛋白合成和分泌能力，通过增殖和组织修复作用促进伤口愈合和皮肤弹性。
hsf细胞具有免疫调节功能，释放细胞因子和生长因子促进组织修复。

hsf细胞参数表

细胞名称	HSF人皮肤成纤维细胞
种属	人
组织来源	真皮组织
细胞来源	一名男性的皮肤组织，由中科院昆明细胞库建立（2009年）
建系方式	慢病毒转染SV40基因
细胞类型	永生化人皮肤成纤维细胞
细胞形态	典型的成纤维细胞形态，长条状或梭形
生长条件	温度：37°C；CO2浓度：5%；湿度：70%-80%；
培养基成分	DMEM+ FBS 15% +P/S 1%
增殖能力	稳定的连续增殖能力
主要分泌物质	大量胶原蛋白、弹力蛋白等结构蛋白质
功能特点	促进皮肤组织修复，增强皮肤弹性和紧致度，具有免疫调节功能
特殊特性	可以在组织工程技术中与其他细胞构建3D皮肤模型
检测结果	细菌检测：阴性；真菌检测：阴性；支原体检测：阴性；内毒素含量(EU/mL)：≤3
倍增时间	每周2至3次
换液频率	2-3天换液一次
冻存条件	冻存液：90%FBS，DMSO 10%
传代比例	1:2传代
传代方法	建议1:2-1:3 两天换液一次
生物安全级别	2
细胞活力	95%（Viability by Trypan Blue Exclusion）
主要应用	构建3D皮肤模型，体外测试皮肤功能和安全性，研究皮肤老化、伤口愈合、基因传递、硬皮病等

培养教程

hsf人皮肤成纤维细胞培养

HSF细胞复苏方法

将含有1 mL 细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻。
加入10mL 培养基混合均匀后，在1000rpm条件下离心4 min，弃去上清液。
补加培养基后吹匀，将所有细胞悬液加入培养瓶或10cm皿中，培养过夜。
第二天换液并检查细胞密度，确保细胞粘附和生长状态良好。

HSF细胞传代方法

当细胞密度达到80%-90%时，进行传代培养。
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入1 mL 消化液，置于37°C培养箱中消化1-2 min，观察细胞消化情况。
迅速停止消化，轻敲几下培养瓶后加入少量培养基。
补加6-8 mL/瓶培养基，轻轻打匀后离心5 min，弃去上清液，补加培养基后吹匀。
将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿或瓶中，继续培养。

HSF细胞冻存方法

在细胞生长状态良好时进行冻存。
弃去培养基后，用PBS清洗细胞，加入1 mL 胰酶消化。
细胞脱落后加入1 -4mL 含血清的培养基终止消化，计数细胞。
离心5 min（1000rpm），去掉上清液后加入培养基重悬细胞。
根据细胞数量加入适量无血清细胞冻存液混匀后，每支冻存管冻存1 mL 细胞悬液。
冻存管放入程序降温盒，置于-80°C冰箱冷冻4小时以上后转入液氮气相储存，记录位置以便下次使用。