HMRC-5人胚肺细胞注意事项
该细胞为有限传代细胞系，传代次数过高会导致细胞生长特性发生变化，建议到货3代内完成实验。
培养条件：
MRC-5细胞推荐使用MEM培养基，并添加10%特级胎牛血清，1%NEAA、1%丙酮酸钠和1%谷氨酰胺。在培养过程中，维持气相为空气95%和CO2 5%，温度为37℃。
培养步骤：
收到细胞后，先观察培养瓶是否完好，若有异常情况及时与提供细胞的机构联系。
用75%酒精处理培养瓶表面，然后将培养瓶置于37℃培养箱中静置2-4小时，以稳定细胞状态。
将培养基预热至37℃。
吸取培养瓶中大部分培养基，并留下10-12ml，观察MRC-5人胚肺成纤维细胞密度并拍照记录。若细胞密度大于80%，即可进行传代培养。
如细胞密度低于70%，可留下8-10ml培养基继续培养，直至细胞密度达到80%以上再进行传代培养。
若进行传代培养，先吸取原有培养基，然后加入胰酶消化1-2分钟，观察细胞变圆脱落后加入适量的含血清的培养基终止消化。
轻轻混匀细胞后，以适当的速度离心5分钟，弃去上清液，并补充1-2ml新的培养基。
将MRC-5人胚肺成纤维细胞均匀地分到新的培养瓶中，补足培养基，并放回培养箱中培养。
细胞冻存：
将细胞按照传代步骤进行消化，并离心至获得细胞沉淀。
加入预先配制好的冻存液轻轻重悬细胞，并转移至标记好的冻存管中。
将冻存管放入程序性冻存盒中，然后置于-80℃冰箱过夜。
24小时后，将细胞转移到液氮保存，并记录细胞保存位置。
细胞复苏：
准备完全培养基并准备37℃水浴器。
从液氮中取出MRC-5人胚肺成纤维细胞，迅速放入37℃温水中融化，然后离心1-2分钟。
弃去冻存液，加入完全培养基轻轻重悬细胞，然后接种至培养皿。
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