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产品名称:MEG-01细胞(人成巨核细胞白血病细胞)
产品详细说明
  • 来源:人成巨核细胞转换期的骨髓细胞
  • 细胞特征:半贴半悬 , 淋巴母细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:抗原表达:CD41+;CD61+;CDw14+

MEG-01细胞系源自一名患有慢性粒细胞白血病(CML)的55岁男性患者的骨髓成巨核细胞转换期。
MEG-01细胞的分离和研究始于1983年,由日本名古屋大学医学院完成。MEG-01细胞是超二倍体;模态数=56至58;费城染色体(Ph1)存在。

MEG-01细胞特性

  • MEG-01细胞表达细胞质因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa、高碘酸-Schiff(PAS)反应阳性、α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶阳性。

  • MEG-01细胞髓过氧化物酶、α丁酸萘酯酶、氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和碱性磷酸酶阴性。

  • MEG-01细胞使用单克隆抗体BA-1(抗B细胞,粒性白细胞)、HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗单核细胞,血小板)染色,呈阳性。

  • MEG-01细胞对其他淋巴和骨髓类抗体染色呈阴性。

  • 抗原表达:CD41+;CD61+;CDw14+

MEG-01细胞参数表

细胞名称 MEG-01细胞(人成巨核细胞白血病细胞)
细胞别称 Meg-01; MEG01; Meg01; 人成巨核细胞白血病细胞
种属来源
组织来源 骨髓
疾病特征 慢性粒细胞白血病
细胞形态 淋巴母细胞样
生长特性 半贴半悬
生长培养基 RPMI-1640+10% 胎牛血清 (FBS)+1% 青霉素/链霉素 (P/S)
培养条件 气相:95% 空气 + 5% CO2,温度:37°C
冻存液 60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO,液氮冻存
倍增时间 ~35-48 小时
推荐传代比例 1:2 - 1:3
推荐换液频率 每周 2-3 次
安全等级 BSL1
质量检测 细菌、真菌、支原体检测均为阴性
基础参数 细胞直径约为10-15μm,生长速度中等,形态保持稳定,无细胞凋亡迹象。
培养相关的参数 培养密度约每平方厘米1-2×10^5个细胞,推荐在培养初期密度不要过高以避免细胞死亡。
其他参数 可耐受0.25%三乙胺叔丁酸酯(EDTA)和0.05%胰酶,但应避免长时间暴露于消化酶。
保藏机构 ATCC; CRL-2021; JCRB; IFO50151

培养教程

MEG-01人成巨核细胞白血病细胞培养教程

细胞特性与培养要点

  • MEG-01细胞在培养过程中通常呈现少量黑点样碎片,无需特殊处理。大部分细胞呈不规则圆形悬浮状态,同时存在少量梭形贴壁细胞。

培养方法(以T25培养瓶为例)

  • MEG-01细胞属于半贴壁半悬浮细胞类型,建议维持细胞密度在3-10×10^5 cells/mL。初始接种密度不低于3×10^5 cells/mL,当细胞达到约10×10^5 cells/mL时进行传代。

培养操作

  • 每隔3天进行一次细胞计数,根据密度调整操作。若细胞密度低于3×10^5 cells/mL,可使用小容器(如孔板)继续培养。

传代方法

  • 半换液方法:当细胞密度不足8×10^5 cells/mL时,进行半换液。缓慢吸出一半培养液,以1200 rpm离心3分钟,收集细胞后加入等体积新鲜培养基轻轻吹打,接回原瓶继续培养。

  • 1:2稀释传代:当细胞密度接近10×10^5 cells/mL时,将细胞等体积分装到两个新培养瓶中,每瓶补充新鲜培养基至总体积5 mL。

特殊注意事项

  • MEG-01细胞增殖较慢,对培养环境和操作敏感,需减少移动操作并保持稳定的培养温度。

  • 尽可能减少吹打次数,传代和取样时轻轻吹打3-5次即可。

  • 每天监测细胞状态,若密度过高未及时处理,易导致细胞死亡,需严格控制培养密度。

  • 每3天至少进行一次半换液或传代,每周进行一次全离心换液。

冻存与复苏方法

  • 推荐冻存密度:3~5×10^6 cells/mL。

  • 冻存液配比:55% RPMI-1640 + 40% FBS + 5% DMSO。使用程序冻存盒进行梯度降温冻存,过夜置于-80°C冰箱后转移至液氮储存。

STR鉴定及相关

Amelogenin X,Y
CSF1PO 10
D2S1338 19
D3S1358 15
D5S818 13
D7S820 11
D8S1179 14,15
D13S317 8
D16S539 9
D18S51 18,22
D19S433 14,16
D21S11 29
FGA 26
Penta D 11,13
Penta E 15
TH01 7
TPOX 8,11
vWA 16
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