KG-1细胞是由H.P. Koeffler和D.W. Golde建立的人急性骨髓性白血病细胞系，源自59岁白人男性（起初患有红白血病，后演变为急性粒细胞性白血病）的骨髓抽取物。

KG-1细胞在形态上表现急性髓性白血病特征，以多形性为主，骨髓母细胞和骨髓细胞占主要部分，少量为成熟的粒细胞和少数巨噬细胞及嗜曙红细胞。

KG-1细胞的染色体接近二倍体，2S组分占1.8%。在大多数中期分裂相中，五个标志物（组成型标志物）较为常见。模态染色体数目为47（或46加上一个小于G1组的中心染色体），正常染色体5、7、8、12和17为单体，其他染色体为二体。在Q带制剂中可以检测到Y染色体。

kg-1细胞特性

• kg-1细胞形态上类似急性髓原白血病，表现为明显的多形性。

• 在佛波酯存在下，kg-1细胞可以分化为巨噬细胞，并对集落刺激因子（CSF）表现出良好的反应。

• kg-1细胞系适用于癌症、免疫学和毒理学研究，同时也是转染宿主的理想选择。

• 抗原表达包括HLA A30、A31、B35、Cw4。

• 基因表达为HLA DR。

• kg-1细胞系为EBNA阴性（EBNA-）。

• 同工酶表达包括AK-1（0）、ES-D（1）、G6PD（B）、GLO-I（2）、Me-2（1）、PGM1（1-2）、PGM3（0）。

kg-1细胞参数表

kg-1人急性骨髓性白血病细胞培养教程

KG-1细胞复苏

• 迅速将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中摇晃解冻。

• 将解冻后的KG-1细胞悬液加入到含有4-6mL完全培养基的离心管中，混合均匀。

• 在1000 RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液，用完全培养基重悬KG-1细胞。

• 将KG-1细胞悬液加入到含有6-8mL完全培养基的培养瓶（或培养皿）中，37℃培养过夜。

• 第二天显微镜下观察KG-1细胞生长情况和细胞密度。

KG-1细胞传代

• 当KG-1细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代。

• 将悬浮状态下的KG-1细胞收集到离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃去上清液。

• 按照2-4×10^5个/mL的密度用新鲜培养基重悬KG-1细胞，将细胞悬液按1:2至1:4的比例分到新的T25瓶中，添加6-8mL新鲜培养基。

• 每间隔2-3天更换培养基或进行传代。

KG-1细胞冻存

• 收集KG-1细胞并进行计数，确定冻存密度为1×10^6至1×10^7个活细胞/mL。

• 1000 RPM离心3-5分钟，去除上清液，用70%IMDM+20%FBS+10%DMSO冻存液重悬KG-1细胞。

• 将KG-1细胞悬液分配到冻存管中，每管1mL，标记好名称、代数和日期。

• 将冻存管置于程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，然后转入液氮中储存。

注意事项

• KG-1细胞冻存复苏后的24小时内存活率可能降至50%以下，可见细胞间隙大量碎片，这是正常现象。

• 定期检查KG-1细胞状态，确保无支原体污染，细胞生长正常。