KHOS-240S细胞系来源于一名13岁女性的骨肉瘤组织，是从KHOS/NP细胞（ATCC CRL-1544）衍生出的回复突变株。KHOS-240S细胞最初经40.5℃条件下短暂过夜处理后建立，随后在36℃下进行亚克隆，获得稳定的细胞株。KHOS-240S细胞形态表现为上皮样并以贴壁方式生长，具有骨肉瘤细胞典型的形态学和生物学特征。

KHOS-240S细胞在遗传学背景上继承了母株KHOS/NP的特点，同时表现出一定的热刺激适应性。KHOS-240S细胞在培养过程中通常需要每周更换培养液2-3次。在裸鼠体内缺乏致瘤性，在半固体培养基中形成集落。且不再含有可重建的MSV基因组，因此常作为骨肉瘤研究中一种稳定的实验模型。

KHOS-240S细胞系被广泛应用于多方面研究，包括骨肉瘤发生发展的分子机制探索、信号通路分析、抗癌药物筛选及疗效评价，以及与遗传学和分子生物学相关的基础实验。

KHOS-240S细胞特性特征

• khos-240s细胞呈上皮样形态，具有成纤维细胞外观。

• khos-240s细胞贴壁生长，换液频率约每周2-3次。传代比例通常为1:2至1:3。

• KHOS-240S细胞不含可挽救的MSV（鼠肉瘤病毒）基因组，不具备致瘤性。

• khos-240s细胞不具有病毒相关的致瘤基因，但表达骨肉瘤相关的肿瘤特异抗原，具备Kirsten sarcoma病毒相关的回复突变特征（历史背景）。

• khos-240s细胞系具有典型的骨肉瘤细胞的基因表达特征，能产生未成熟骨样物质。

• khos-240s细胞提供有STR（短串联重复序列）基因图谱，标志含有如Amelogenin、CSF1PO等多种位点，便于细胞身份鉴定。

• 相关基因表达包含骨肉瘤细胞中常见的肿瘤相关基因，涉及细胞增殖、迁移及肿瘤进展。

• 不具备病毒致瘤基因，显示为基因稳定性较好。

• KHOS-240S是骨肉瘤研究中的常用细胞模型，反映肿瘤细胞的侵袭性和转移特性。

• khos-240s细胞适用于肿瘤药物筛选、基因功能研究以及骨肿瘤分子机制探讨。

KHOS-240S人骨肉瘤细胞系参数表

KHOS-240S人骨肉瘤细胞系培养教程

KHOS-240S细胞复苏

• 从液氮罐取出KHOS-240S细胞冻存管，立即用75%酒精擦拭外壁，在超净台内操作。

• 将冻存管快速置于37℃水浴锅中，轻轻摇晃1–2分钟直至细胞悬液完全融化。

• 将细胞悬液转入含有完全培养基（MEM+10%FBS）的离心管中，1000 rpm离心4–5分钟。

• 弃去上清后用新鲜培养基重悬KHOS-240S细胞，转入T25瓶或6 cm皿中。

• 放入37℃、5% CO₂培养箱中培养，24小时后换液，去除死亡细胞和碎片。

KHOS-240S细胞传代

• 当KHOS-240S细胞汇合度达80–90%时进行传代。

• 弃去培养基，用无钙镁PBS清洗1–2次。

• 加入0.25%胰酶-EDTA消化液，37℃孵育1–3分钟，显微镜下观察细胞变圆。

• 轻拍瓶壁助细胞脱落，加入完全培养基终止消化。

• 将细胞吹打成单细胞悬液，1000 rpm离心4分钟，弃去上清。

• 用新鲜培养基重悬KHOS-240S细胞，并按1:2至1:3比例分瓶接种继续培养。

KHOS-240S细胞冻存

• 选择处于对数生长期的KHOS-240S细胞进行冻存。

• 消化并收集细胞，PBS洗涤一次后离心弃去上清。

• 用冻存液（50%MEM + 40%FBS + 10%DMSO）重悬细胞，调整浓度为1×10⁶–1×10⁷ 个/mL。

• 每管分装1 mL，标记细胞名称、日期及代次。

• 将冻存管置入程序降温盒，-80℃缓慢降温过夜，第二天转入液氮罐长期保存。

注意事项

• KHOS-240S细胞在复苏及冻存操作中必须严格保持无菌，避免污染。

• KHOS-240S细胞复苏后应尽快更换培养液，确保存活率和状态恢复。

• 胰酶消化时间不宜过长，以免损伤KHOS-240S细胞。

• 长期培养中需定期检测细胞形态与增殖状态，确保其生物学特性稳定