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产品名称:SJSA1细胞(人骨肉瘤细胞)
产品详细说明
  • 来源:股骨
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:扩增MDM2基因(编码p53相关蛋白); gli原癌基因扩增15倍。

SJSA-1细胞系最初于1982年建立,源自一名19岁黑人男性患者的原发性股骨骨肉瘤。SJSA1细胞系最初被称为OsA-CL,后改名为SJSA-1。
SJSA-1细胞表现为上皮样,并具有贴壁生长的特性。
SJSA1细胞系的核型特征为44XY-1、-4、-7、-9、-11、-14、-15,伴有染色体异常,包括+del(1)(q32;q42)、+5p+、+der(7)t(4;HSR;7)(4qter-4q12::HSR::7p22-7qter)、+9p+,扩增的gli原癌基因序列在衍生的7号染色体的HSR中。

SJSA1细胞(人骨肉瘤细胞)特征特性

  • SJSA-1细胞含有编码p53相关蛋白MDM2的基因,且该基因有扩增。

  • gli原癌基因在SJSA1细胞中有15倍的扩增。

  • 编码p53相关蛋白的基因存在,这可能对p53通路的研究有重要意义。

  • MDM2基因扩增,这是一个重要的肿瘤抑制基因p53的负调控因子。

  • gli基因的扩增可能与细胞的恶性转化有关

SJSA1细胞参数表

细胞名称 SJSA1细胞(人骨肉瘤细胞)
细胞别称 SJSA-1 / OsA-CL; SJSA1; SJSA; OsA-CL; OSA-CL; OsACL; OSACL; Os-A; OSA; OsA
建立信息 1982年,19岁黑人男性
组织来源 股骨原始多能肉瘤
形态特征 上皮样,贴壁生长
培养基/血清 RPMI-1640,10%胎牛血清,1%双抗(如庆大霉素-两性霉素B混合溶液)
培养环境 37°C,5% CO2,70-80%湿度
传代信息 比例1:3至1:6,周期约2-3天
冻存条件 90%血清+10% DMSO,>1x10^6 细胞/mL
储存温度 -80°C(短期)或液氮(长期)
复苏方法 37°C水浴快速解冻,离心去除冻存液
基因特征 MDM2基因扩增,gli原癌基因15倍扩增
蛋白表达 含p53相关蛋白编码基因
研究用途 骨肉瘤,p53通路,MDM2相关研究
模型建立 可用于异种移植模型
生长周期 细胞周期约24小时
安全等级 BSL-1
包装规格 T25瓶或1mL冻存管
使用限制 仅供科研使用,不可用于临床

培养教程

SJSA1人骨肉瘤细胞培养教程

SJSA-1细胞复苏

  • 将1 mL SJSA-1细胞冻存液在37°C水浴中快速解冻。

  • 将解冻的SJSA-1细胞悬液加入到4-6 mL预热的完全培养基中。

  • 1000 rpm离心5分钟,弃去上清。

  • 用新鲜完全培养基重悬SJSA-1细胞。

  • 将SJSA-1细胞转移到T25培养瓶中,总体积约6-8 mL。

  • 放入37°C、5% CO2培养箱中培养。

SJSA-1细胞传代

  • 当SJSA-1细胞密度达到70%-80%时进行传代。

  • 用PBS轻轻清洗SJSA-1细胞1-2次。

  • 加入适量胰蛋白酶-EDTA消化液,在37°C下消化2-3分钟。

  • 显微镜下观察,当SJSA-1细胞变圆并开始脱落时,轻拍培养瓶。

  • 加入含血清的完全培养基终止消化。

  • 1000 rpm离心5分钟,弃去上清。

  • 用新鲜完全培养基重悬SJSA-1细胞。

  • 按1:3至1:6的比例进行传代(首次传代建议1:2)。

日常维护

  • 每2-3天更换SJSA-1细胞培养基一次。

  • 观察SJSA-1细胞形态和生长状态。

  • 控制SJSA-1细胞密度,避免过度生长。

SJSA-1细胞冻存

  • 制备冻存液:90%血清 + 10% DMSO。

  • 收集对数生长期的SJSA-1细胞。

  • 调整SJSA-1细胞浓度至>1x10^6细胞/mL。

  • 将SJSA-1细胞悬液分装到冻存管中。

  • 使用程序降温仪或逐步降温法将SJSA-1细胞冻存。

  • 转移到-80°C冰箱(短期)或液氮(长期)保存。

收到SJSA-1细胞后的处理

  • 使用75%酒精消毒SJSA-1细胞培养瓶的外壁。

  • 将培养瓶置于37°C细胞培养箱内静置2-4小时,以便稳定SJSA-1细胞状态。

  • 在显微镜下观察SJSA-1细胞状态,确认细胞是否完好,拍摄细胞显微照片(10×,20×)各2-3张,以及培养瓶外观照片作为记录。

  • 如果SJSA-1细胞密度低于60%,去除培养瓶中的灌液培养基,将未贴壁的SJSA-1细胞离心回收后重悬于新配制的完全培养基中,再加入到原培养瓶中。

  • 如果SJSA-1细胞密度达到70%-80%以上,可进行传代处理。由于运输振动可能导致细胞脱落,需要离心回收SJSA-1细胞后进行传代。

  • 运输用的培养基(灌液培养基)不能继续使用,应更换为新配制的完全培养基。

注意事项

  • 操作过程中保持无菌环境。

  • 定期检查SJSA-1细胞是否有污染。

  • 避免SJSA-1细胞过度生长或密度过低。

  • 不要使用运输用的灌液培养基继续培养SJSA-1细胞。

  • 首次传代后,密切关注SJSA-1细胞状态,必要时调整培养条件。

STR鉴定及相关

Amelogenin X,Y
CSF1PO 10,11
D2S1338 21,25
D3S1358 16,17
D5S818 12
D7S820 9,11
D8S1179 13,15
D13S317 12,13
D16S539 9,10
D18S51 15,17
D19S433 14.2,15 (ATCC=CRL-2098)
15 (PubMed=19787792)
D21S11 28,33.2
FGA 22,23
Penta D 2.2,10
Penta E 11,14
SE33 21.2,27.2
TH01 7,9
TPOX 8,9
vWA 19

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