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产品名称:NCI-H929细胞(人骨髓瘤细胞)
产品详细说明
  • 来源:骨髓;恶性胸腔积液
  • 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+0.05mM β-mercaptoethanol+10% FBS+1% P/S
  • 其他:基因特征:c-myc原癌基因重排,并表达c-myc RNA;存在一个激活的ras等位基因表达

NCI-H929细胞系来源于一名62岁白人女性多发性骨髓瘤患者的恶性胸腔积液。NCI-H929细胞是一种B淋巴细胞,接近四倍体,并且大多数8号染色体的拷贝具有8q+异常。

NCI-H929细胞系具有以下特性和特征

  • 抗原阳性表达:浆细胞抗原1(PCA-1)、CD38(T10)、转铁蛋白受体

  • 抗原阴性表达:HLA-DR、CALLA、早期B细胞发育标志物、EB病毒核抗原(EBNA)

  • 分子标志物:表达转铁蛋白

  • 免疫球蛋白表达:产生IgA类型免疫球蛋白,κ轻链

  • 基因特征:c-myc原癌基因重排,并表达c-myc RNA;存在一个激活的ras等位基因表达

  • 生长特性:悬浮生长,形态呈淋巴母细胞样

NCI-H929细胞参数表

细胞名称 NCI-H929细胞(人骨髓瘤细胞)
细胞别称 NCI-H929; NCI H929; NCIH929; H929; H-929; h929
细胞来源 人骨髓瘤细胞,62岁白人男性的恶性胸腔积液
组织来源 骨髓
生长特性 悬浮生长
细胞形态 淋巴母细胞样
染色体特征 接近四倍体,8号染色体大多数拷贝有8q+异常
培养基 RPMI-1640 + 10% 胎牛血清(FBS)+  0.05 mM β-巯基乙醇,1% 双抗
培养条件 37°C,5% CO2,湿度70%-80%
培养参数 传代比例 1:2 至 1:3;细胞密度维持 5×10^5 至 1×10^6 cells/ml;换液频率 每周2-3次
冻存环境 冻存液:90% 血清,10% DMSO ; 液氮或-80°C
表面抗原表达 阳性:PCA-1,CD38,转铁蛋白受体; 阴性:HLA-DR,CALLA,EBNA,早期B细胞发育标志物
免疫球蛋白表达 IgA,κ轻链
基因特征 c-myc原癌基因重排,激活的ras等位基因表达
生物安全等级 BSL-1
应用 多发性骨髓瘤研究,药物筛选
细胞代数 10代以内
支原体检测 阴性
保藏机构 ATCC (CRL-9068); DSMZ (ACC-163); ECACC (9505041); 中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
供应限制 仅限于科学研究,不可用于治疗

培养教程

NCI-H929人骨髓瘤细胞培养教程

NCI-H929细胞的复苏步骤

  • 在37°C水浴中快速解冻NCI-H929细胞冻存管。

  • 将解冻的NCI-H929细胞悬液转移到含4-6 mL完全培养基的离心管中。

  • 以1000 rpm离心3-5分钟以去除保存液。

  • 弃去上清液,用完全培养基重悬NCI-H929细胞。

  • 将重悬的NCI-H929细胞悬液转移到含6-8 mL完全培养基的培养瓶中。

  • 在37°C下培养NCI-H929细胞过夜。

NCI-H929细胞传代

  • 细胞密度:保持NCI-H929细胞在5×10^5至1×10^6 cells/mL之间。

  • 传代比例:1:2至1:3,确保NCI-H929细胞的健康增殖。

  • 换液频率:每周2-3次,保证NCI-H929细胞的营养供应。

具体传代步骤

  • 收集NCI-H929细胞悬液,以1000 rpm离心5分钟。

  • 弃去上清液,用预热的完全培养基重悬NCI-H929细胞。

  • 按1:2或1:3的比例将NCI-H929细胞分配到新的培养瓶中。

  • 补充完全培养基至适当体积以维持NCI-H929细胞的生长。

NCI-H929细胞冻存

  • 冻存液配方:90%血清,10% DMSO,适用于NCI-H929细胞的长期保存。

  • 收集对数生长期的NCI-H929细胞,以1000 rpm离心5分钟。

  • 弃去上清液,用冻存液重悬NCI-H929细胞。

  • 将NCI-H929细胞悬液分装到冻存管中,每管约1×10^6-1×10^7个细胞。

  • 使用程序降温盒或-80°C冰箱缓慢降温。

  • 24小时后将NCI-H929细胞转移到液氮中长期保存。

注意事项

  • 培养基配方:确保使用高质量的培养基成分,特别是适用于NCI-H929细胞的RPMI-1640、FBS、β-巯基乙醇和双抗。

  • 细胞密度控制:保持适当的细胞密度,以保证NCI-H929细胞的健康生长。

  • 传代频率:根据NCI-H929细胞的生长情况,每周进行2-3次传代。

  • 培养条件:严格控制培养条件,确保培养箱参数适合NCI-H929细胞。

  • 无菌操作:保持严格的无菌操作,防止NCI-H929细胞的污染。

  • 细胞状态观察:每天观察NCI-H929细胞形态、密度和生长状况。

  • 使用低代次细胞:建议使用10代以内的NCI-H929细胞进行实验。

  • 冻存与复苏:按照标准程序进行NCI-H929细胞的冻存和复苏。

  • 培养基更换:定期更换新鲜完全培养基,保证NCI-H929细胞的营养供应。

  • 细胞鉴定:定期进行STR鉴定,确保NCI-H929细胞系的纯度。

STR鉴定及相关

Amelogenin X
CSF1PO 10,11 (ATCC=CRL-3580; DSMZ=ACC-163)
11 (CCRID=1101HUM-PUMC000360; Cosmic-CLP=724825; ECACC=95050415; Technion Genomics Center BCF)
D1S1656 17.3
D2S441 10,14
D2S1338 17,19
D3S1358 15
D5S818 11,12
D7S820 10,12
D8S1179 11,13
D10S1248 13
D12S391 19.3
D13S317 12
D16S539 9,13
D18S51 15,18
D19S433 13,14
D21S11 28,29
D22S1045 15
FGA 21,24
Penta D 12,13 (DSMZ=ACC-163)
12,14 (Technion Genomics Center BCF)
Penta E 7,10
TH01 9.3
TPOX 8,11
vWA 14,15
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