MM.1R细胞是1990年从一名42岁的黑人女性多发性骨髓瘤患者的外周血中分离，是一种B淋巴母细胞系。MM.1R细胞对地塞米松具有耐药性。MM.1R细胞是从母细胞株MM.1中衍生出来的，MM.1细胞是一种对类固醇疗法产生抗药性的多发性骨髓瘤患细胞。

mm.1r细胞特性

• mm.1r细胞系对地塞米松具有耐药性，而MM.1S细胞系对地塞米松敏感。

• mm.1r细胞复苏后需要大约两周才能恢复正常生长。

• 抗原表达：CD25阴性、CD38阳性、CD52阳性、CD59阳性

• 基因表达：λ轻链免疫球蛋白表达。

• 表达标记：表达糖皮质激素受体，但不表达。

mm.1r细胞参数表

mm.1r人多发性骨髓瘤细胞培养教程

细胞传代

• mm1r细胞生长至适当密度（通常为培养瓶表面的80%覆盖），首先弃去培养上清液。

• 用PBS润洗mm1r细胞：加入不含钙和镁离子的PBS，轻轻润洗mm1r细胞1-2次。

• 消化mm1r细胞：加入足量的0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液，确保消化液充分覆盖所有mm1r细胞表面。将培养瓶置于37℃培养箱中，通常1分钟后观察mm1r细胞是否变圆脱落。

• 终止消化：当大部分mm1r细胞开始变圆并脱离表面时，快速将培养瓶移回操作台，轻轻敲击几下培养瓶，并加入适量完全培养基终止消化过程。

• 收集mm1r细胞：将mm1r细胞悬液转移到15ml离心管中，以1000rpm离心4-5分钟，去除上清液。

• mm1r细胞重悬：用1-2ml完全培养基轻轻悬浮mm1r细胞沉淀，然后根据需要按1:2的比例分配到新的含有充足培养基的培养瓶中。

• 培养条件：将培养瓶放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。在传代后24小时内更换新的培养基，以促进mm1r细胞生长和健康状态。

细胞冻存

• mm1r细胞收集和计数：当mm1r细胞达到适当的生长状态时，可以进行冻存。收集mm1r细胞及培养液，转移至无菌离心管中。

• 离心和洗涤：以1000rpm离心4-5分钟，去除上清液，并用PBS洗涤一次。

• mm1r细胞计数和冻存液配制：根据mm1r细胞计数，将mm1r细胞重悬于适量的冻存液中（通常为90% FBS + 10% DMSO），使mm1r细胞浓度在5×10^6~1×10^7细胞/ml之间。

• 冻存管标记和冷冻：将冻存液中的mm1r细胞按1ml/支分装入冻存管中，确保每支冻存管都标记清楚细胞类型、传代数、日期等信息。首先在-20℃冰箱中快速冷冻1.5小时，然后转移到-80℃冰箱中过夜，最终存储在液氮中长期保存。

细胞复苏

• mm1r细胞解冻：从液氮中快速取出冻存管，将其迅速置于37℃水浴中，直到冻存管中的冰块完全融化。注意避免过度搅动或振荡，以免对mm1r细胞造成损伤。

• mm1r细胞重悬：将冻存管中的mm1r细胞悬液缓慢加入到15ml离心管中，用预热的完全培养基轻轻悬浮mm1r细胞沉淀。

• mm1r细胞分配：将悬液按需要分配到新的含有适量培养基的培养瓶中，通常每个T25瓶需要添加6ml完全培养基。

• 培养：将培养瓶放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。观察mm1r细胞的生长情况和密度，根据需要在培养后24小时内进行液体更换。