CAL33细胞系是在1983年从一名69岁男性的中度分化鳞状细胞舌癌手术切除组织中建立。CAL33细胞在裸鼠中具有致瘤性，已在癌症基因组图谱（CCLE）中列出，具有基因组和蛋白质分析的潜力。CAL33细胞专用于科研，适合癌症研究和药物筛选等领域。

CAL33细胞参数表

CAL33人舌磷癌细胞培养教程

CAL33细胞复苏

• 将CAL33细胞冻存管放入37°C水浴中快速解冻，同时轻轻摇动以确保细胞均匀解冻。

• 将解冻后的CAL33细胞悬液转移至含有10 mL预热培养基的离心管中，轻轻混匀。

• 在1000 rpm下离心3分钟，弃去上清液。

• 加入1-2 mL新鲜培养基，轻轻吹打以确保CAL33细胞悬浮均匀。

• 将细胞悬液转移至培养瓶中，放置于37°C、5% CO₂的培养箱中培养过夜，以确保CAL33细胞适应新环境。

CAL33细胞传代

• 传代条件：当CAL33细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 弃去培养瓶中的旧培养基，用不含钙、镁离子的PBS冲洗CAL33细胞1-2次。

• 加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），确保完全覆盖CAL33细胞。

• 将培养瓶置于37°C培养箱中消化1分钟。

• 观察CAL33细胞状态，若大部分细胞变圆并脱落，则迅速加入少量培养基以终止消化。

• 将细胞悬液转入无菌离心管中，1000 rpm离心4分钟，弃去上清液。

• 加入适量新鲜培养基（6-8 mL），轻轻混匀后按1:2或1:3的比例分配至新的培养瓶中，继续培养CAL33细胞。

CAL33细胞冻存

• 收集CAL33细胞及培养液，转移至无菌离心管中，1000 rpm离心4分钟，弃去上清液。

• 用PBS清洗CAL33细胞，并弃去PBS，进行细胞计数。

• 根据CAL33细胞数量，加入冻存液，使细胞密度达到5×10^6至1×10^7细胞/mL，轻轻混匀。

• 将1 mL CAL33细胞悬液分装至冻存管中，并标记清楚。

• 将冻存管放入-80°C冰箱中冷冻24小时，然后转移至液氮中长期保存CAL33细胞。