CAL27细胞是由J·Gioanni于1982年从一名56岁的白人男性舌头中部的病变部位建立的上皮细胞系。
CAL27细胞为多角形，胞浆呈高度颗粒状，模态数为43，非整倍体。CAL 27细胞表现出明显的致瘤性，在裸鼠皮下接种后能够在6周内形成实体瘤。CAL27细胞对角蛋白抗体呈强阳性染色。

CAL27细胞在半固态培养基中生长不良。对于化疗药物如VP16、CCNU、VM26、ADM、CPA和MTX的作用下，CAL 27细胞的胸苷掺入显著受抑制，表现出耐药性对于VDS、CDP和ACTD。

1993年，提交给ATCC的CAL 27培养物被发现受到支原体污染，后经过BM细胞周期蛋白治疗21天，细胞得以恢复正常。

cal27细胞特性

• cal27细胞从一名56岁的白人男性舌头中部的病变部位建立。

• cal27细胞为上皮细胞，多角形，胞浆高度颗粒状。

• cal27细胞的模态数为43，为非整倍体。

• cal27细胞具有致瘤性，裸鼠皮下接种2 x 10^6个细胞后在6周内形成实体瘤。

• 免疫细胞化学研究显示CAL 27细胞对角蛋白抗体呈强阳性染色。

• cal27细胞在半固态培养基中生长不良。

• cal27细胞对VP16（依托泊苷）、CCNU（1-[2-氯乙基]-3-环己基-1-硝基脲）、VM26（替尼泊苷）、ADM（阿霉素）、CPA（环磷酰胺）和MTX（甲氨蝶呤）存在下，观察到胸苷掺入的显著抑制。

• cal27细胞对VDS（硫酸vindesine sulfate）、CDP（顺式铂）或ACTD（放线菌素D）处理具有抗性。

• 1993年提交给ATCC的CAL 27培养物被发现受到支原体污染，后通过21天的BM细胞周期蛋白治疗恢复正常。

cal27细胞参数表

cal27人舌鳞癌细胞培养

CAL 27 细胞传代步骤

• 当CAL 27细胞密度达到80%-90%时，可进行传代培养。具体步骤如下：

• 弃去上清：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗CAL 27细胞1-2次。

• 消化：加入1ml胰酶（消化液）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化2-4分钟，显微镜下观察消化情况，CAL 27细胞大部分变圆并脱落时，迅速取出培养瓶，轻敲几下后加入胰酶3倍体积的培养基终止消化。

• 离心：用巴氏管轻轻打匀后吸出，1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液。

• 重悬：加入适量培养液后吹匀CAL 27细胞。

• 分瓶：首次传代时推荐将CAL 27细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或瓶中，建议冻存一支备用。后续传代可根据实际情况按1:2至1:4的比例进行。

CAL 27 细胞冻存步骤

• 消化与计数：CAL 27细胞冻存时，弃去培养基，用PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入3ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

• 离心与重悬：5分钟1000RPM离心去掉上清。加入1ml血清重悬CAL 27细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10^6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。

• 冻存：将冻存管置于程序降温盒中，放入-80℃冰箱，至少2小时后转入液氮罐储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

注意事项

• 形态与生长特性：CAL 27细胞呈上皮细胞样，贴壁生长，常用于口腔鳞状细胞癌相关研究。

• 推荐培养条件：使用DMEM培养基，添加10%胎牛血清，在37℃、5% CO₂培养箱中培养CAL 27细胞。

• 传代与倍增：CAL 27细胞倍增时间约为35小时，传代周期为2-4天，按1:2至1:4的比例进行传代。