Detroit 562细胞是从一名白人女性咽头癌患者的咽部分离得到的上皮细胞，广泛应用在癌症研究、3D细胞培养，Detroit 562细胞系存在细胞遗传学不稳定性。

Detroit 562细胞在病毒感染方面显示对人类脊髓灰质炎病毒1和水泡性口腔炎病毒具有易感性。细胞表现出角蛋白的基因表达，并通过免疫过氧化物酶染色显示对角蛋白阳性。

Detroit 562细胞特性

• 细胞来源：白人女性咽头癌患者的咽部

• 细胞类型：上皮细胞

• 应用：用于癌症研究和3D细胞培养

• 细胞模态数：64，范围在58到128之间

• 核型：94%的细胞具有大的近端标记染色体，臂比为3:4，每个细胞有5到6分钟的染色体

• 细胞遗传学不稳定性：文献报道了Detroit 562细胞系存在细胞遗传学不稳定性

• 转移性：胸腔积液

• 病毒易感性：人类脊髓灰质炎病毒1、水泡性口腔炎病毒

• 基因表达：角蛋白

• 同工酶：G6PD，B

• 免疫染色：Detroit 562细胞对角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性

Detroit 562细胞参数表

Detroit 562人咽头癌胸水转移细胞培养

解冻操作

• 在收到后尽快解冻，并立即进行培养。

• 如需继续冻存，应在液氮蒸汽相中存储，避免-70°C存储以防失活。

• 在37°C水浴中轻轻摇动解冻，约2分钟。

• 解冻过程中保持O型环和盖子远离水面，以减少污染风险。

• 解冻完成后立即从水浴中取出，用70%乙醇浸泡或喷洒进行消毒。

传代操作

• 移除和丢弃培养基

• 用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA溶液轻轻冲洗细胞层，去除所有含有胰酶抑制剂的血清残留物。

• 向瓶中加入2.0至3.0 mL Trypsin-EDTA溶液，观察细胞在倒置显微镜下分散（通常在5至15分钟内）。

• 不要在等待Detroit 562细胞脱落时通过敲击或摇晃培养瓶来搅动细胞，难以分散的细胞可放置在37°C条件下促进分散。

• 加入6.0至8.0 mL完全培养基，轻轻吸取细胞悬液。

• 向新的培养容器中加入适量的细胞悬液。

• 在37°C下孵育细胞。

冻存操作

• 用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

• 加入2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞消化情况。

• Detroit 562细胞大部分变圆并脱落后，快速将培养瓶拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入适量培养基终止消化。

• 在1000RPM条件下离心4分钟，去除上清液。

• 加入1-2mL培养基，轻轻混匀后吹匀。

• 将细胞悬液按细胞密度不低于1x10(6)/ml加入含DMSO的冻存液，终浓度为5%。

• 标识冻存管，放入-80°C冰箱冷冻2小时后转入液氮灌存。

• 记录冻存管位置以便下次使用。