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产品名称:RPMI-2650细胞(人鼻腔上皮细胞)
产品详细说明
  • 来源:鼻子;鼻中隔
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样,多角形,边缘不规则
  • 培养基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
  • 其他:通过免疫过氧化物酶染色,RPMI-2650细胞对角蛋白呈阳性反应

RPMI-2650细胞系源自一名52岁男性的鳞状细胞癌患者,其肿瘤起源于鼻中隔,并转移至胸腔,导致胸腔积液的产生。该患者的癌症被确诊为间变性鳞状细胞癌,这是一种罕见的鼻中隔恶性肿瘤。

RPMI-2650细胞系具备准二倍体核型,染色体数目保持稳定,是一种特有的永久性人类细胞系。RPMI-2650细胞系的细胞通常较小,倾向于成簇生长,并在培养基中融合形成致密的细胞层。RPMI-2650细胞系在癌症研究和毒理学领域中具有重要意义,尤其是在与鼻腔疾病和药物递送系统相关的研究中。

RPMI-2650细胞特性特征

  • 免疫标记:通过免疫过氧化物酶染色,RPMI-2650细胞对角蛋白呈阳性反应,这表明其上皮细胞的特征。

  • MUC5AC水平:研究显示,RPMI-2650细胞的MUC5AC水平较低,这与其在鼻腔药物递送模型中的应用相关。MUC5AC是一种重要的粘液糖蛋白,通常与呼吸道上皮的功能相关。

  • 纤毛标记:RPMI-2650细胞系表现出较低的纤毛标记和跨膜电阻(TEER),这可能影响其在模拟鼻腔生理条件下的功能。

  • 基因组稳定性:RPMI-2650细胞可能携带一些与肿瘤发生相关的基因突变或表达异常,但具体的基因组分析数据尚需进一步研究确认。

  • 应用潜力:RPMI-2650细胞系在癌症研究、药物递送系统开发及毒理学评估中具有广泛应用潜力,尤其是在研究鼻腔相关疾病及药物透过性的机制方面

RPMI-2650细胞参数表

细胞名称 RPMI-2650细胞(人鼻腔上皮细胞)
别称 RPMI 2650; RPMI2650; R.P.M.I. #2650; Roswell Park Memorial Institute 2650
细胞来源 52岁男性鳞状细胞癌患者鼻中隔转移胸腔积液
疾病特征 间变性鳞状细胞癌
组织来源 鼻中隔
形态特征 上皮细胞样,多角形,边缘不规则
生长特性 贴壁生长
染色体稳定性 稳定
免疫标记 对角蛋白呈阳性
培养基 EMEM基础培养基或DMEM + 10% FBS + 1% P/S
气相条件 95%空气,5% CO₂
培养温度 37°C
传代方法 1:2至1:6,每周2次
细胞密度传代 达到80%-90%时进行传代
换液频率 每2-3天更换培养基
冻存液成分 90% 完全培养基 + 10% DMSO
冻存温度 -80°C后转入液氮储存
支原体检测 阴性
安全等级 1
PH值 7.2 - 7.4
微生物检测 阴性
储存条件 2~8°C
应用领域 癌症研究、药物递送系统开发、毒理学研究

培养教程

RPMI-2650人鼻腔上皮细胞培养教程

检查和初始处理

  • 收到RPMI-2650细胞后,检查运输容器是否完整,是否有漏液现象。如有问题,及时联系供应商。

  • 将RPMI-2650细胞置于显微镜下,观察细胞的形态和密度。如果细胞生长正常,继续培养操作。

  • 去除培养瓶的封口膜后,将RPMI-2650细胞置于37°C培养箱内孵育2-3小时,使细胞适应新的环境。

  • 弃去原培养基,添加6 mL新鲜的DMEM/F12完全培养基,继续培养,待RPMI-2650细胞密度达80%-90%时进行传代操作。

RPMI-2650细胞复苏步骤

  • 从液氮中取出冻存的RPMI-2650细胞,迅速置于37°C水浴中,轻轻摇晃,直至完全融化。

  • 解冻后,将RPMI-2650细胞悬液加入4 mL预温的培养基中混匀。

  • 以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。

  • 补加1-2 mL新鲜培养基轻轻吹打细胞悬液,将其移入10 cm培养皿或T25培养瓶中,加入8 mL培养基。

  • RPMI-2650细胞在37°C、5% CO₂培养箱中孵育过夜。次日更换新鲜培养基并检查细胞的状态和密度。

RPMI-2650细胞传代

  • 当RPMI-2650细胞达到80%-90%汇合度时,准备进行传代操作。

  • 弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS冲洗RPMI-2650细胞1-2次,以去除残余的血清和代谢物。

  • 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分钟,观察RPMI-2650细胞变圆并脱落。

  • 当细胞大部分脱落后,轻敲培养瓶,并加入少量培养基终止消化。

  • 收集消化后的RPMI-2650细胞悬液,1000 RPM离心4分钟后,弃去上清。加入1-2 mL培养基将细胞重新悬浮,并按1:2的比例进行分瓶培养。

RPMI-2650细胞冻存

  • 选择状态良好的RPMI-2650细胞,弃去旧培养基并用PBS清洗细胞。

  • 加入1 mL胰酶消化RPMI-2650细胞,加入培养基终止消化,利用血球计数板对细胞进行计数,确保每冻存管含细胞密度不低于1×10⁶细胞。

  • RPMI-2650细胞收集后离心,加入含10% DMSO和90%血清的冻存液重悬,确保DMSO终浓度为10%。

  • 将1 mL RPMI-2650细胞悬液分装至冻存管中,置于程序降温盒中,在-80°C冷冻2小时后移入液氮长期保存。做好冻存管的标识,并记录其位置。

STR鉴定及相关

Amelogenin X,Y
CSF1PO 9,11
D2S1338 20,25
D3S1358 17
D5S818 12,13
D7S820 8,11
D8S1179 9,13
D13S317 11,12
D16S539 11,12
D18S51 16
D19S433 14,16
D21S11 28,33.2
FGA 23,25
Penta D 9,10
Penta E 11,19
TH01 6,8
TPOX 8
vWA 16,18
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