92-1细胞（人眼葡萄膜黑色素瘤细胞系）

92-1细胞系是一种来源于人类葡萄膜黑色素瘤的上皮样肿瘤细胞系，最初建立自一位76岁女性患者右眼眶的原发性葡萄膜黑色素瘤组织。92-1细胞系是在欧洲委员会第五框架计划（合同编号QLRI-CT-2001-01325）资助的ESTDAB项目（European Searchable Tumour Cell Line Database）中收集的170余种特征性黑色素瘤细胞系之一。ESTDAB数据库提供了包括HLA基因型及其表面表达、肿瘤相关抗原的表达谱、抗原加工机制、细胞因子/趋化因子产生与响应特征、以及粘附分子与凋亡调控蛋白表达等多项免疫学与肿瘤生物学相关参数，有助于研究者在免疫学、肿瘤转移、化疗敏感性及基因表达等领域开展系统研究。

92-1细胞系经STR分型验证其人源性及系别特异性，具备明确的分子身份识别信息。目前，92-1细胞被广泛应用于解析葡萄膜黑色素瘤的分子通路、信号转导及免疫相关机制，同时也是抗肿瘤候选药物筛选、基因功能研究及异种移植（CDX）模型构建的重要工具。

92-1细胞（人眼葡萄膜黑色素瘤细胞系）特性特征

92-1细胞表现出上皮样形态，贴壁依赖性强，具有中等增殖速度，倍增时间约为38至58小时，适合在常规体外培养条件下稳定传代。
92-1细胞具有特定的HLA基因型和表面HLA分子表达，适合免疫学和免疫遗传学研究。
92-1细胞表达多种肿瘤相关抗原，有助于研究肿瘤免疫逃逸机制。
92-1细胞具备抗原处理和呈递功能，支持免疫相关实验。
92-1细胞能够产生并响应多种细胞因子和趋化因子，反映肿瘤微环境的复杂性。
92-1细胞表达与细胞凋亡相关的调节分子，适合研究肿瘤细胞的生存机制。
92-1细胞为GFAP（胶质纤维酸性蛋白）阳性，显示部分小神经胶质细胞特征，但未检测到其他神经元或胶质细胞标记。
92-1细胞表达调控细胞凋亡的相关分子及细胞粘附分子，涉及肿瘤细胞的生存、侵袭和转移能力。
92-1细胞保留葡萄膜黑色素瘤的关键基因表达特征，适合肿瘤生物学和信号通路研究。
相关研究显示黑色素瘤细胞存在多种转录状态，92-1细胞可能体现melanocytic与intermediate状态的部分特征，涉及转录因子SOX6、NFATC2、EGR3等。
TBX2等转录因子在葡萄膜黑色素瘤的增殖、侵袭和免疫逃逸中发挥重要作用，92-1细胞可用于相关机制研究
经过STR（短串联重复序列）鉴定，确认92-1细胞的人源性和细胞系特异性，保证细胞系的身份和稳定性。
92-1细胞是葡萄膜黑色素瘤研究的重要体外模型，成为眼部恶性肿瘤基础研究及转化医学研究中的常用模型系统之一。
基因表达：保留葡萄膜黑色素瘤的关键基因表达特征，适合肿瘤生物学、基因功能和信号通路研究

92-1细胞（人眼葡萄膜黑色素瘤细胞系）参数表

细胞名称	92-1人眼葡萄膜黑色素瘤细胞系（est dab-127）
英文名称	Human uveal melanoma ,92-1,92_1、92.1、921
种属	人
性别/年龄	女性，76岁
组织来源	眼睛葡萄膜黑色素瘤
细胞类型	肿瘤细胞
细胞形态	上皮细胞样
生长方式	贴壁生长（部分文献提及可悬浮生长，但主流为贴壁）
倍增时间	38小时（PubMed=24994677）；58小时（PubMed=7622289）
培养基	RPMI-1640 + 10%胎牛血清 + 1% L-丙氨酰-谷氨酰胺 + 1%青链霉素（P/S）
培养温度	37℃
培养气体环境	5% CO₂，95%空气
传代比例	1:2至1:4（首次传代建议1:2）
换液周期	每周2-3次
生物安全等级	BSL-1
HLA基因型及表面表达	具有特定HLA基因型和表面HLA分子表达，支持免疫学和免疫遗传学研究
肿瘤抗原表达	表达多种肿瘤相关抗原，反映肿瘤免疫逃逸及抗原加工能力
抗原加工与呈递能力	具备抗原加工和呈递功能
细胞因子和趋化因子产生与响应	能产生并响应多种细胞因子和趋化因子，反映肿瘤微环境复杂性
凋亡调节分子表达	表达调控细胞凋亡的相关分子
细胞粘附及辅助分子表达	表达多种细胞粘附分子，涉及肿瘤侵袭和转移能力
基因表达特征	保留葡萄膜黑色素瘤的关键基因表达特征，适合肿瘤生物学及信号通路研究
保藏机构	ECACC（European Collection of Authenticated Cell Cultures）；ICLC（Italian Cell Line Collection）
供应限制	仅供科研使用
细胞纯度	高纯度肿瘤细胞
细胞检测	STR鉴定确认细胞身份，保证无交叉污染
细胞活力	复苏后存活率高，适合长期培养
传代次数限制	建议使用早期传代细胞，避免长期传代导致细胞特性改变

培养教程

92-1人眼葡萄膜黑色素瘤细胞系培养教程

92-1细胞的复苏步骤

水浴快速解冻：预热37℃水浴锅。
取出冻存的92-1细胞冻存管，迅速置于水浴中解冻，过程中持续轻轻摇晃，控制解冻时间在1-2分钟内，避免温度过高损伤细胞。
去除冻存保护剂：将解冻后的92-1细胞悬液转移至离心管，加入5 ml预热完全培养基（RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 青链霉素-链霉素）。1000 rpm离心5分钟，轻柔弃去上清液，保留细胞沉淀。
细胞复悬与接种：轻轻重悬92-1细胞于新鲜培养基中，接种于T25培养瓶中。置于37℃、5% CO₂培养箱中培养，首次培养24小时后更换培养基，以去除死细胞与残余DMSO。

92-1细胞的传代方法

观察细胞融合度：当92-1细胞生长至瓶底面积的80%左右时，应及时传代，避免过度融合。
消化操作：弃去培养液，用PBS洗涤一次。加入0.25%胰蛋白酶（1 ml/T25瓶），在显微镜下观察细胞变圆并开始脱落，一般需1-3分钟。
终止反应与离心：加入等体积完全培养基终止胰酶消化反应。收集细胞悬液，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
细胞接种：用新鲜完全培养基重悬92-1细胞，按1:2比例接种至新瓶中。将培养瓶放回培养箱，常规每2-3天更换培养基一次。

92-1细胞的冻存步骤

选取处于对数生长期、生长状态良好的92-1细胞进行冻存。按照传代流程消化并收集细胞。
使用台盼蓝排染法进行细胞计数，调整至5×10⁵至1×10⁷个细胞/ml。
冻存液常用配方为90%完全培养基 + 10% DMSO。亦可选用无血清商用冻存液。
将92-1细胞悬液与冻存液轻柔混合，避免气泡产生。
每支冻存管装入1 ml细胞悬液，贴上清晰标签。
放入程序降温盒中，4℃预冷后置于-80℃过夜，使温度降速约1℃/min。
次日将92-1细胞冻存管移入液氮罐中长期保存（-196℃），以维持细胞活力。

注意事项

所有关于92-1细胞的操作均需在无菌条件下进行，建议在Ⅱ级生物安全柜中完成。
胰酶消化时间不宜过长，以免影响92-1细胞黏附能力与活力。
冻存与复苏时应尽量避免反复冻融，避免造成细胞损伤。
定期检测细胞状态及污染（如支原体）是保障实验质量的必要步骤。